3D-печать органов: технологии и возможности

3D-принтинг, или аддитивное производство, — технология, которая позволяет создавать физические объекты из геометрических моделей путём последовательного добавления материала¹. Напечатанные объекты нашли применение и в медицине: например, таким образом изготавливают обучающие модели, инструменты, протезы и импланты. Однажды учёные догадались использовать в качестве материала живые клетки, и это дало толчок к развитию тканевой инженерии.

Технология 3D-принтинга

Первый этап — создание трёхмерной цифровой модели с помощью системы автоматизированного проектирования CAD (Computer-aided Design). Готовую модель можно рассмотреть на мониторе или через очки виртуальной реальности и при необходимости отредактировать².

Трёхмерная модель CAD конвертируется в файл формата Standard Tessellation Language (STL). Это первый формат, разработанный специально для систем 3D-печати. STL поддерживается практически всеми 3D-принтерами³. Однако у него есть ограничения по функциональности, поэтому появился Additive Manufacturing File (AMF) и ещё около 30 альтернатив. Фигура в STL или другом формате «нарезается» на слои⁴.

Когда цифровая модель готова, за дело принимается принтер. Существует несколько технологий печати:

1. Binderjetting (BJ). Печатающая головка в определённых местах наносит на слой порошка связующее вещество. Затем распыляется новый порошковый слой, и процесс повторяется. Постепенно создаётся модель, вокруг которой остаётся неиспользованный порошок⁵.

2. Directedenergy deposition (DED). Для печати используется лазер. Одновременно с теплом на рабочую поверхность подают металлическую проволоку или порошок с газом. Расплавленный материал остывает, образуя готовый слой нужной формы⁶.

3. Powderbed fusion (PBF). Если при DED материал распыляется направленно, то PBF работает сразу с целым слоем. Металлический порошок выборочно плавится с помощью лазера⁶.

4. Materialextrusion (ME). Нагретый термопластичный материал подаётся через сопло. Слой за слоем формируется трёхмерная фигура⁷.

5. Materialjetting (MJ). Жидкий материал подаётся каплями. Готовые слои охлаждаются и затвердевают или их обрабатывают ультрафиолетовыми лучами⁸.

6. Sheetlamination (SL). Тонкие листы материала скрепляют между собой в ходе печати, например с помощью ультразвуковой сварки⁹.

7. VatPhotopolymerization (VPP). В ёмкость заливают светочувствительную жидкую смолу. Слой материала становится твёрдым под действием света, лазера или ультрафиолета. Разновидность технологии — стереолитография (SLA)⁹.

Заключительный этап — постобработка. Её задача — улучшить свойства, производительность и эстетику детали. Изделие могут почистить, покрасить, обработать паром. Чтобы деталь была более устойчива к температуре или царапинам, используют химические и физические методы обработки⁴.

История 3D-печати

Технология появилась в 80-х годах¹⁰:

• 1977 — Суэйнсон и Кремер запатентовали схему создания «трёхмерных систем»;

• 1980 — Хидео Кодама предложил способ 3D-печати, при котором на светочувствительную смолу воздействовали УФ-лучами, но получить патент ему не удалось;

• 1983 — Чарльз Халл запатентовал стереолитографию (SLA), положив начало коммерческой 3D-печати;

• 1988 — компания 3D-systemsпредставила первый коммерческий принтер SLA-1.

C 2005 года начинается движение в сторону потребительской печати. Дорогая инновация постепенно становится доступным инструментом. Первые проекты в этой области — Rep Rap от Университета Бата в Англии и Fab@Home от Корнелльского университета в США. Устройства относились к разряду DIY (Do It Yourself), то есть позволяли модифицировать технологию под свои задачи¹¹.

Зарождение биологической печати

В 1988 году появился метод микропозиционирования клеток¹²:

1. Клетки размещаются в заранее заданных точках на субстрате под компьютерным контролем.

2. Формируется двухмерный слой толщиной в одну клетку — монослой.

3. Монослои можно объединять, чтобы создавать трёхмерные ткани.

В 2003 году Томас Боланд создал метод струйной печати с использованием жизнеспособных клеток и запатентовал его три года спустя. Впечатляющая разработка вдохновлена обычным офисным принтером. Чтобы напечатать картинку, устройство оставляет на бумаге чернила в соответствии с цифровым изображением. Учёный заменил чернила на жидкость, содержащую клетки, а бумагу — на специальный субстрат. Ему удалось напечатать структуры из клеток бактерий и млекопитающих¹³.

В 2009 году появляется один из первых коммерческих 3D-биопринтеров — Novogen MMX¹⁴.

3D-печать и биопринтинг в медицине

Аддитивное производство широко применяется в медицине, например в фармакологической промышленности. С его помощью можно изготавливать препараты с контролируемым высвобождением, которые трудно сделать традиционными методами. Можно составлять сложные комбинации из нескольких активных веществ¹⁵.

С помощью 3D-печати из пластмасс, металлов или керамики можно изготавливать^16,17.18:

• зубные протезы и импланты;

• модели анатомических структур;

• инструменты и детали для медицинских изделий;

• ортопедические направляющие и шины.

Биопринтинг — подраздел аддитивного производства, тесно связанный с регенеративной медициной. Биопринтинг изучает методы создания клеточных структур, имитирующих ткани человека. Для этого используется органический материал — жизнеспособные клетки и биологические молекулы¹⁹.

Биочернила

Биочернила — материал для биопринтинга, содержащий живые клетки. К биочернилам предъявляется ряд требований²⁰:

• биосовместимость — не вызывают побочных реакций со стороны организма;

• биоразлагаемость — могут безопасно распадаться в ходе естественных процессов;

• пригодность для печати;

• структурная целостность после печати.

Клетки в биочернилах могут быть организованы в виде сфероидов. Такая форма получается после центрифугирования или под действием гравитации, когда питательную среду с клетками переворачивают²¹.

Помимо клеток в биопринтинге используется натуральный или синтетический биоматериал²²:

• гидрогели: альгинат, желатин, коллаген, гиалуроновая кислота и другие;

• синтетические полимеры: полиэтиленгликоль (PEG), поликапролактон (PCL).

В биочернила также добавляют²²:

• наноматериалы: наночастицы серебра AgNP, наностержни золота AuNR, углеродные нанотрубки CNT;

• биоактивные молекулы: белки, стимулирующие рост клеток, плазму крови.

Биоматериал создаёт условия для роста клеток и поддерживает их положение в пространстве, то есть служит для создания своеобразных «строительных лесов»²².

Как работает биопринтер

Процесс биопринтинга можно разделить на несколько этапов²³:

1. Моделирование. Чтобы создать модель органаили ткани, в медицине используют диагностические изображения. Рентгенограммы, КТ- и МРТ-снимки преобразуются в цифровую форму, подходящую для технологии трёхмерной печати.

2. Изготовление биочернил. Выбирают подходящий гидрогелевый или силиконовый биоматериал. Затем проводят забор образца ткани пациента. Целевые стволовые клетки выделяют и размножают в лаборатории.

3. Создание печатной структуры. Биочернила наносят на рабочую подложку согласно цифровой модели.

4. Созревание. Напечатанная ткань или органпомещается в биореактор, где поддерживается их жизнедеятельность. Клетки находятся в комфортной среде с оптимальной температурой, получают нужные питательные вещества и кислород. Чтобы ткань созрела, её подвергают специальному химическому и механическому воздействию.

Какие биопринтеры используют чаще всего^20,22,24:

1. Струйный (Inkjet-based). Рядом с печатным соплом расположен нагревательный элемент. Он повышает температуру, что приводит к образованию пузырьков в биочернилах. Они наносятся на рабочую подложку в виде капель. Температура не влияет на клетки, так как воздействие недолгое, длится всего пару микросекунд. В пьезоэлектрических струйных биопринтерах вместо нагревания используется вибрация.

2. Экструзионный (Extrusion-based). Биочернила наносятся на рабочую подложку под давлением. При пневматической экструзии давление обеспечивается потоком воздуха, а при механической — поршнем или винтом.

3. Лазерный (Laser-assisted). На донорскую ленту, покрытую гидрогелевым биоматериалом, воздействуют лазером. Из-за лазерного импульса биочернила отделяются от ленты и в виде капель переходят на рабочую подложку.

Напечатанная ткань или орган используются в трансплантации, при испытании новых лекарств, в научных исследованиях²³.

Что можно создать на биопринтере

Медицина сталкивается с нехваткой доноров, которые могли бы предоставить органы для пересадки. Трансплантация также осложняется этическими, религиозными и правовыми вопросами²⁵. Поэтому биопринтинг предстаёт особенно привлекательной идеей. Но он требует долгой и напряжённой работы многих специалистов.

Печать сосудов и тканей

Исследователи рассматривают биопринтинг как возможность создавать альтернативу тканям человека:

1. Кожа. Для изготовления аналогов кожи используются коммерчески доступные клеточные линии или образец ткани человека. Помимо имплантации волосяных фолликулов, меланоцитов и других клеток, необходимо напечатать сосуды. Заменители кожи могут использоваться для ускорения заживления ран и уменьшения размеров рубца, но их применение в клинической медицинепока ограничено²⁶.

2. Нервная ткань. Нервный трансплантат создают из клеток — предшественниц нейронов, которые сочетают с подходящим биоматериалом. Исследователи стараются, чтобы новые нейроны сформировали связи и нормально функционировали. Напечатанная нервная ткань может помочь при лечении травм головного и спинного мозга, нейродегенеративных заболеваний²⁷.

3. Ткани опорно-двигательного аппарата. Напечатанные стволовые клетки могут развиваться в костную ткань, мышцы, хрящи или сухожилия. При выращивании трансплантатов важно добиться механических свойств родной ткани: упругости, жёсткости и устойчивости к нагрузкам. Биопечатные конструкции могут пригодиться в медицинепри лечении травм и дегенеративных заболеваний опорно-двигательного аппарата²⁸.

Сосуды в биопринтинге создают двумя методами. Первый — когда в напечатанный материал внедряются вещества, способствующие росту сосудов из подходящих клеток. Второй заключается в непосредственной печати полых конструкций²⁹. Они могут иметь сложную геометрию и многослойную структуру. Учёные даже способны задавать определенную толщину стенки и диаметр будущего сосуда³⁰.

Печать органов

Печать органов человека на 3D-принтере — задача потруднее, чем в случае с тканями. Причина в том, что у органов сложная архитектура и множество функций.

Израильские учёные из Тель-Авивского университета в 2019 году впервые напечатали сердце. Несмотря на небольшой размер (около 2 см), у органа было всё необходимое для функционирования: кровеносные сосуды и камеры — предсердия и желудочки. Для создания биочернил использовали образец жировой ткани человека. Жировые клетки перепрограммировали в стволовые, а затем — в клетки сердца³¹.

В урологии с помощью биопринтинга создают искусственные органы мочевыделительной системы — мочевой пузырь и мочеиспускательный канал. Для этого используют эпителий, выстилающий органы изнутри, и гладкие мышечные клетки. Клеточный материал имплантируют на сферический или трубчатый каркас, содержащий коллаген. Напечатанные органы должны адекватно растягиваться и сокращаться, чтобы накапливать и выводить мочу. Тогда их можно применять для пластики поражённых «родственников»³².

Биопринтинг в стоматологии

Аддитивное производство незаменимо в стоматологии. Полость рта пациента сканируют, данные загружают в программу для CAD и создают трёхмерную модель. Затем на принтере печатают изделия для реставрации зубов: металлические коронки, зубные протезы, титановые имплантаты³³.

Биопринтинг зубов выполняет ту же задачу, но другими методами. Чтобы создать биочернила, специалисты по тканевой инженерии в стоматологии используют³⁴:

• фрагмент зубных тканей или десны, из которых выделяют стволовые клетки, способные к развитию в нужном направлении;

• факторы роста, стимулирующие рост мягких тканей, образование костной ткани и сосудов.

В качестве гидрогелей для биопринтинга используют коллаген, альгинат или фибрин. Если нужно напечатать твёрдые ткани, например альвеолярную кость, добавляют гидроксиапатит, фосфат кальция и силикат кальция, а также углеродные нанотрубки³⁵.

Проведены исследования, в ходе которых с помощью напечатанных тканей восстановили форму зуба, закрыли дефект в верхней и нижней челюсти, ускорили регенерацию мягких и твёрдых тканей³⁴.

Можно ли пересаживать напечатанные органы?

3D-печать органов для операций по пересадке — технология, которая по мере развития создаёт всё новые вызовы в медицине³⁶:

1. Требования к трансплантации. Органдолжен быть иммунологически совместим с организмом пациента и иметь подходящий размер для пересадки. Также необходимо обеспечить подходящие условия для транспортировки напечатанного органа к операционной.

2. Необходимость послеоперационного наблюдения. Пока данных об эффективности применения технологии 3D-печати в трансплантологии недостаточно, на этом фоне традиционные методы выглядят более надёжными. Необходимо тщательно следить, как напечатанный органвыполняет свои функции после пересадки. Для этого проводятся лабораторные и инструментальные исследования.

3. Этические и правовые проблемы. Чтобы создать орган, необходимо правильно получать и хранить цифровые данные и клеточный материал. Технология пересадки должна доказать свою безопасность в ходе тестов.

Биопринтеры в России

В России технологии и материалы для биопринтинга создаёт лаборатория 3D Bioprinting Solutions, основанная компанией INVITRO. Отечественные принтеры Fabion и Fabion 2, разработанные лабораторией, поддерживают печать с помощью тканевых сфероидов и гидрогелей на основе коллагена, альгината и желатина³⁷.

Несмотря на небольшое количество крупных игроков, интерес к биопринтингу в России растёт. У 3D-печати есть немалый потенциал: напечатанные органы могут решить проблему недостатка доноров, улучшив жизнь пациентов с тяжёлыми заболеваниями. Однако исследователи указывают на камень преткновения на пути к трансплантации будущего — сложность сертификации технологии при недостаточном субсидировании отрасли³⁸.

В инновационном центре «Сколково» обсуждают, как продукт может покинуть лабораторию и оказаться на рынке. Российские специалисты обозначают основные «рельсы»: стандартизация процесса, привлечение инвесторов и постоянный обмен идеями между участниками сообщества³⁹.

Источники

1. Shahrubudin, N., Lee, T. C., & Ramlan, R. (2019). An overview on 3D printing technology: Technological, materials, and applications. In Procedia Manufacturing(Vol. 35, pp. 1286-1296). Elsevier B.V. https://doi.org/10.1016/j.promfg.2019.06.089.

2. Ghosh RM, Jolley MA, Mascio CE, Chen JM, Fuller S, Rome JJ, Silvestro E, Whitehead KK. Clinical 3D modeling to guide pediatric cardiothoracic surgery and intervention using 3D printed anatomic models, computer aided design and virtual reality. 3D Print Med. 2022 Apr 21;8(1):11. doi: 10.1186/s41205-022-00137-9. PMID: 35445896; PMCID: PMC9027072.

3. Mahmood, A.; Akram, T.; Chen, H.; Chen, S. On the Evolution of Additive Manufacturing (3D/4D Printing) Technologies: Materials, Applications, and Challenges. Polymers 2022, 14, 4698. https://doi.org/10.3390/ polym14214698.

4. Dizon, J.R.C.; Gache, C.C.L.; Cascolan, H.M.S.; Cancino, L.T.; Advincula, R.C. Post-Processing of 3D-Printed Polymers. Technologies 2021,9,61. https://doi.org/10.3390/ technologies9030061.

5. Mirzababaei S, Pasebani S. A Review on Binder Jet Additive Manufacturing of 316L Stainless Steel. Journal of Manufacturing and Materials Processing. 2019; 3(3):82. https://doi.org/10.3390/jmmp3030082.

6. Lim, JS., Oh, WJ., Lee, CM. et al. Selection of effective manufacturing conditions for directed energy deposition process using machine learning methods. Sci Rep 11, 24169 (2021). https://doi.org/10.1038/s41598-021-03622-z.

7. Gonzalez-Gutierrez, Joamin & Cano Cano, Santiago & Schuschnigg, Stephan & Kukla, Christian & Sapkota, Janak & Holzer, Clemens. (2018). Additive Manufacturing of Metallic and Ceramic Components by the Material Extrusion of Highly-Filled Polymers: A Review and Future Perspectives. Materials. 11. 840. 10.3390/ma11050840.

8. Gülcan O, Günaydın K, Tamer A. The State of the Art of Material Jetting-A Critical Review. Polymers (Basel). 2021 Aug 23;13(16):2829. doi: 10.3390/polym13162829. PMID: 34451366; PMCID: PMC8399222.

9. Saleh Alghamdi S, John S, Roy Choudhury N, Dutta NK. Additive Manufacturing of Polymer Materials: Progress, Promise and Challenges. Polymers (Basel). 2021 Feb 28;13(5):753. doi: 10.3390/polym13050753. PMID: 33670934; PMCID: PMC7957542.

10. CHAPTER 1: An Introduction to 3D Printing , in 3D Printing in Chemical Sciences: Applications Across Chemistry, 2019, pp. 1-21 DOI: 1039/9781788015745-00001. eISBN: 978-1-78801-574-5.

11. Savini and G. G. Savini, «A short history of 3D printing, a technological revolution just started,» 2015 ICOHTEC/IEEE International History of High-Technologies and their Socio-Cultural Contexts Conference (HISTELCON), Tel-Aviv, Israel, 2015, pp. 1-8, doi: 10.1109/HISTELCON.2015.7307314.

12. Klebe RJ. Cytoscribing: a method for micropositioning cells and the construction of two- and three-dimensional synthetic tissues. Exp Cell Res. 1988 Dec;179(2):362-73. doi: 10.1016/0014-4827(88)90275-3. PMID: 3191947.

13. Boland, Thomas; Wilson, William Crisp; and Xu, Tao, «Ink-jet printing of viable cells» (2006). Clemson Patents. 218. https://tigerprints.clemson.edu/clemson_patents/218.

14. Karzyński, Kamil & Kosowska, Katarzyna & Ambrozkiewicz, Filip & Berman, Andrzej & Cichoń, Justyna & Klak, Marta & Serwańska-Świętek, Marta & Wszola, Michal. (2018). Use of 3D bioprinting in biomedical engineering for clinical application Wykorzystanie biodruku 3D we współczesnej inżynierii biomedycznej i medycynie. Medical Studies. 34. 10.5114/ms.2018.74827.

15. Chen X, Wang S, Wu J, Duan S, Wang X, Hong X, Han X, Li C, Kang D, Wang Z, Zheng A. The Application and Challenge of Binder Jet 3D Printing Technology in Pharmaceutical Manufacturing. Pharmaceutics. 2022 Nov 24;14(12):2589. doi: 10.3390/pharmaceutics14122589. PMID: 36559082; PMCID: PMC9786002.

16. Barro Ó, Arias-González F, Lusquiños F, Comesaña R, del Val J, Riveiro A, Badaoui A, Gómez-Baño F, Pou J. Improved Commercially Pure Titanium Obtained by Laser Directed Energy Deposition for Dental Prosthetic Applications. Metals. 2021; 11(1):70. https://doi.org/10.3390/met11010070.

17. Vanmunster L, D’Haeyer C, Coucke P, Braem A, Van Hooreweder B. Mechanical behavior of Ti6Al4V produced by laser powder bed fusion with engineered open porosity for dental applications. J Mech Behav Biomed Mater. 2022 Feb;126:104974. doi: 10.1016/j.jmbbm.2021.104974. Epub 2021 Nov 23. PMID: 34883458.

18. Salmi M. Additive Manufacturing Processes in Medical Applications. Materials (Basel). 2021 Jan 3;14(1):191. doi: 10.3390/ma14010191. PMID: 33401601; PMCID: PMC7796413.

19. Kačarević ŽP, Rider PM, Alkildani S, Retnasingh S, Smeets R, Jung O, Ivanišević Z, Barbeck M. An Introduction to 3D Bioprinting: Possibilities, Challenges and Future Aspects. Materials (Basel). 2018 Nov 6;11(11):2199. doi: 10.3390/ma11112199. PMID: 30404222; PMCID: PMC6266989.

20. Yu J, Park SA, Kim WD, Ha T, Xin YZ, Lee J, Lee D. Current Advances in 3D Bioprinting Technology and Its Applications for Tissue Engineering. Polymers (Basel). 2020 Dec 11;12(12):2958. doi: 10.3390/polym12122958. PMID: 33322291; PMCID: PMC7764360.

21. Mironov, Vladimir & Prestwich, Glenn & Forgacs, Gabor. (2007). Bioprinting living structures. Journal of Materials Chemistry — J MATER CHEM. 17. 10.1039/b617903g.

22. Gungor-Ozkerim PS , Inci I , Zhang YS , Khademhosseini A , Dokmeci MR . Bioinks for 3D bioprinting: an overview. Biomater Sci. 2018 May 1;6(5):915-946. doi: 10.1039/c7bm00765e. PMID: 29492503; PMCID: PMC6439477.

23. Zhang J, Wehrle E, Rubert M, Müller R. 3D Bioprinting of Human Tissues: Biofabrication, Bioinks, and Bioreactors. Int J Mol Sci. 2021 Apr 12;22(8):3971. doi: 10.3390/ijms22083971. PMID: 33921417; PMCID: PMC8069718.

24. Hölzl K, Lin S, Tytgat L, Van Vlierberghe S, Gu L, Ovsianikov A. Bioink properties before, during and after 3D bioprinting. Biofabrication. 2016 Sep 23;8(3):032002. doi: 10.1088/1758-5090/8/3/032002. PMID: 27658612.

25. Beyar R. Challenges in organ transplantation. Rambam Maimonides Med J. 2011 Apr 30;2(2):e0049. doi: 10.5041/RMMJ.10049. PMID: 23908807; PMCID: PMC3678939.

26. Olejnik A, Semba JA, Kulpa A, Dańczak-Pazdrowska A, Rybka JD, Gornowicz-Porowska J. 3D Bioprinting in Skin Related Research: Recent Achievements and Application Perspectives. ACS Synth Biol. 2022 Jan 21;11(1):26-38. doi: 10.1021/acssynbio.1c00547. Epub 2021 Dec 30. PMID: 34967598; PMCID: PMC8787816.

27. Bedir T, Ulag S, Ustundag CB, Gunduz O. 3D bioprinting applications in neural tissue engineering for spinal cord injury repair. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2020 May;110:110741. doi: 10.1016/j.msec.2020.110741. Epub 2020 Feb 19. PMID: 32204049.

28. Potyondy T, Uquillas JA, Tebon PJ, Byambaa B, Hasan A, Tavafoghi M, Mary H, Aninwene GE 2nd, Pountos I, Khademhosseini A, Ashammakhi N. Recent advances in 3D bioprinting of musculoskeletal tissues. Biofabrication. 2021 Mar 10;13(2):10.1088/1758-5090/abc8de. doi: 10.1088/1758-5090/abc8de. PMID: 33166949; PMCID: PMC8312688.

29. Chen EP, Toksoy Z, Davis BA, Geibel JP. 3D Bioprinting of Vascularized Tissues for in vitroand in vivo Front Bioeng Biotechnol. 2021 May 13;9:664188. doi: 10.3389/fbioe.2021.664188. PMID: 34055761; PMCID: PMC8158943.

30. Xu L, Varkey M, Jorgensen A, Ju J, Jin Q, Park JH, Fu Y, Zhang G, Ke D, Zhao W, Hou R, Atala A. Bioprinting small diameter blood vessel constructs with an endothelial and smooth muscle cell bilayer in a single step. Biofabrication. 2020 Jul 29;12(4):045012. doi: 10.1088/1758-5090/aba2b6. PMID: 32619999.

31. Noor N, Shapira A, Edri R, Gal I, Wertheim L, Dvir T. 3D Printing of Personalized Thick and Perfusable Cardiac Patches and Hearts. Adv Sci (Weinh). 2019 Apr 15;6(11):1900344. doi: 10.1002/advs.201900344. PMID: 31179230; PMCID: PMC6548966.

32. Orabi H, Bouhout S, Morissette A, Rousseau A, Chabaud S, Bolduc S. Tissue engineering of urinary bladder and urethra: advances from bench to patients. ScientificWorldJournal. 2013 Dec 24;2013:154564. doi: 10.1155/2013/154564. PMID: 24453796; PMCID: PMC3886608.

33. Dawood A, Marti Marti B, Sauret-Jackson V, Darwood A. 3D printing in dentistry. Br Dent J. 2015 Dec;219(11):521-9. doi: 10.1038/sj.bdj.2015.914. Erratum in: Br Dent J. 2016 Jan 22;220(2):86. PMID: 26657435.

34. Cao L, Su H, Si M, Xu J, Chang X, Lv J, Zhai Y. Tissue Engineering in Stomatology: A Review of Potential Approaches for Oral Disease Treatments. Front Bioeng Biotechnol. 2021 Nov 8;9:662418. doi: 10.3389/fbioe.2021.662418. PMID: 34820359; PMCID: PMC8606749.

35. Salar Amoli M, EzEldeen M, Jacobs R, Bloemen V. Materials for Dentoalveolar Bioprinting: Current State of the Art. Biomedicines. 2021 Dec 30;10(1):71. doi: 10.3390/biomedicines10010071. PMID: 35052751; PMCID: PMC8773444.

36. Ravnic DJ, Leberfinger AN, Koduru SV, Hospodiuk M, Moncal KK, Datta P, Dey M, Rizk E, Ozbolat IT. Transplantation of Bioprinted Tissues and Organs: Technical and Clinical Challenges and Future Perspectives. Ann Surg. 2017 Jul;266(1):48-58. doi: 10.1097/SLA.0000000000002141. PMID: 28594678.

37. BioprintingSolutions — лаборатория биотехнологических исследований [Электронный ресурс]: 3D Bioprinting Solutions. URL: https://bioprinting.ru.

38. Токарев Б. Е., Токарев Р. Б. Анализ рыночных перспектив технологий 3d-печати// Вестник евразийской науки. — 2016. — Том 8, № 2. — с. 16.

39. Строители человеческих органов [Электронный ресурс]: Официальный сайт Фонда «Сколково». URL:https://sk.ru/news/stroiteli-chelovecheskih-organov/.